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細胞在液氮罐中的保存步驟 58

點擊次數(shù):1867 更新時間:2020-04-02

怎么在液氮罐里儲存細胞呢?凍存細胞的步驟會影響到細胞復蘇時的活力,所以在使用液氮罐儲存細胞時應小心并按步驟操作:MVE液氮罐

1、預先配制凍存液:10 % DMSO + 90%胎牛血清,4℃冰箱保存預冷;

2、用胰酶對細胞進行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細胞(盡可能溫和);

3、再次用*培養(yǎng)液懸浮細胞,將預冷的凍存液加入消化*的細胞中,用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細胞液,密封后標記凍存細胞名稱和凍存日期。

5、凍存步驟的細致直接關(guān)系到細胞復蘇時的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐**;或者可以在4℃;MVE液氮罐

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